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        DNA的合成、組裝及轉移技術

        發(fā)布時間:2018-11-16 17:16:22  |  來源:中國網(wǎng)·中國發(fā)展門戶網(wǎng)  |  作者:盧俊南 羅周卿 姜雙英等   |  責任編輯:趙斌宇
        關鍵詞:合成生物學,合成基因組學,DNA合成,基因組拼裝,基因組轉移


        圖 1 固相亞磷酰胺法從頭合成寡聚核苷酸鏈的 4 步反應

        4步反應包括:(1)去保護。酸催化去除 DMT(二甲氧基三苯基甲基)基團,以便下一輪堿基(dAdCdGdT)添加。(2)堿基偶聯(lián)。將含有 DMT保護基團護的亞磷酰胺通過四唑活化劑加到未保護的 5′?OH末端。(3)加帽。將游離的 5′?OH乙酰化,以防止進一步的鏈延伸所造成的單堿基缺失。(4)氧化。通過碘液將磷酸三酯氧化為磷酸鹽,進入一個反應循環(huán)

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