圖 1 固相亞磷酰胺法從頭合成寡聚核苷酸鏈的 4 步反應
這 4步反應包括:(1)去保護。酸催化去除 DMT(二甲氧基三苯基甲基)基團,以便下一輪堿基(dA、 dC、 dG和 dT)添加。(2)堿基偶聯(lián)。將含有 DMT保護基團護的亞磷酰胺通過四唑活化劑加到未保護的 5′?OH末端。(3)加帽。將游離的 5′?OH乙酰化,以防止進一步的鏈延伸所造成的單堿基缺失。(4)氧化。通過碘液將磷酸三酯氧化為磷酸鹽,進入一個反應循環(huán)