前兩種拉曼細胞分選技術(shù)均是在細胞靜止或相對靜止狀態(tài)下完成，其通量尚無法滿足高通量的細胞表型功能分選需求。發(fā)展流式拉曼單細胞分選技術(shù)是必然趨勢，但受限于拉曼信號弱這一先天性缺點，首先需要解決高速流動狀態(tài)下細胞拉曼采集這一瓶頸問題。我們開發(fā)了一種基于介電單細胞捕獲/釋放的拉曼激活微流分選（RAMS）技術(shù)，解決了上述瓶頸，率先實現(xiàn)了拉曼流式細胞分選。該?RAMS?系統(tǒng)集成了基于介電的單細胞捕獲釋放單元，可實現(xiàn)高速流動狀態(tài)下單細胞的捕獲，從而完成拉曼信號獲取。在此基礎(chǔ)上，我們進一步建立了拉曼激活液滴分選（RADS）技術(shù)，提高了拉曼細胞分選通量和系統(tǒng)的穩(wěn)定性。由于采用介電液滴分選技術(shù)，RADS?系統(tǒng)是目前已報道工作中全譜分選通量最高的?RACS?系統(tǒng)，通量達數(shù)百個細胞每分鐘，與此同時，針對雨生紅球藻中蝦青素含量的分選準確率達到?95%?以上，分選后細胞存活率達?93%。值得一提的是，目前該分選通量主要受限于拉曼檢測而非系統(tǒng)本身，通過與高靈敏拉曼檢測技術(shù)（如受激拉曼等）耦合，可實現(xiàn)超高通量分選。

上述?RACS?技術(shù)家族的建立與拓展為人工細胞表型檢測和篩選提供了新的、強有力的技術(shù)手段，也為目前?FACS?尚難于解決的應(yīng)用提供了全新的解決方案。但是僅憑上述單元技術(shù)尚無法直接滿足人工細胞的表型篩選的現(xiàn)實需求，亟須針對合成生物技術(shù)的現(xiàn)實需求，構(gòu)建基于上述單細胞拉曼分選關(guān)鍵技術(shù)的細胞篩選全流程和裝備系統(tǒng)。

其他非標記式的細胞功能檢測與分選方法

細胞表型與功能的差異，除體現(xiàn)于光譜性質(zhì)的不同外，還可能導(dǎo)致細胞物理性質(zhì)的變化。因此，通過單細胞物理參數(shù)的測量，也可識別與分選細胞表型。如單細胞電阻抗可反映細胞狀態(tài)，與細胞大小、生長階段等多種表型直接相關(guān)，已被用于分選人體正常細胞與腫瘤細胞。同樣，正常細胞和腫瘤細胞的單細胞力學(xué)參數(shù)有異，細胞形變能力等參數(shù)已展示出腫瘤診斷的潛力^[59]。

上述基于細胞電阻抗、力學(xué)形變能力等物理性質(zhì)也被已經(jīng)應(yīng)用于細胞功能分選。不同的單細胞操控力場如光鑷力、電場力（介電場等）、聲波（表面駐波）、流體力場、磁場等均可以方便地集成到微流控芯片系統(tǒng)中，從而實現(xiàn)高通量、高精準的單細胞功能分選。總體而言，為了適應(yīng)千變?nèi)f化的細胞表型分選需求，基于新概念或新原理的單細胞功能分選技術(shù)不斷涌現(xiàn)，并向著高信號特異性、高檢測動態(tài)范圍、非標記、全景式、高通量、人工智能化等目標方向不斷推進。